第四层为暗红色的红细胞破碎物沉淀，第三层为红色透明的血红蛋白溶液层。

　　8．对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作，错误的是(　　)

　　A．加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐

　　B．让吸管管口沿管壁环绕移动，贴壁加样至色谱柱顶端，不要破坏凝胶面

　　C．打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后，直接连接缓冲液洗脱瓶，开始洗脱

　　D．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，每5 mL收集一管，连续收集流出液

　　解析：选C　打开下端出口，待样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口，再用同样的方法小心加入适量的20 mmol/L的磷酸缓冲液，然后连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，开始洗脱。

　　【能力题组】

　　9．蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述错误的是(　　)

　　A．根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离

　　B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质

　　C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质

　　D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质

　　解析：选A　透析的原理是小分子可以自由通过透析袋，而大分子留在透析袋内，因此可以将蛋白质和溶液中的小分子物质分离。

　　10．以下关于猪血红蛋白提纯的描述，错误的是(　　)

　　A．洗涤红细胞时，使用生理盐水可以防止红细胞破裂

　　B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少

　　C．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测

　　D．在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子质量较小的杂蛋白移动慢

　　解析：选D　在凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，相对分子质量较小的分子容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的分子无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。所以血红蛋白比相对分子质量较小的杂蛋白移动速度要快。

　　11．下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是(　　)

　　A．红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心

　　B．血红蛋白的释放：加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌

　　C．分离血红蛋白溶液：将搅拌好的混合液离心、过滤后，用分液漏斗分离

D．透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，然后置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12 h