目的基因与载体，用DNA连接酶将相同的末端连接起来，A正确；基因表达载体含有启动子、终止子、标记基因和目的基因，密码子位于mRNA上，B错误；抗生素抗性基因可作为标记基因，但标记基因不都是抗生素抗性基因，C正确；基因表达载体的构建是基因工程的核心，在细胞外进行，使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用，D正确。

5．由于质粒与目的基因具有相同的黏性末端，结合过程中不可能出现下列哪种情况(　　)

A．可能形成环状的外源DNA

B．可能形成环状的载体DNA

C．可能出现重组DNA

D．只出现重组DNA

答案　D

6．在基因表达载体的构建中，下列说法不正确的是(　　)

①一个基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子

②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA

③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止

④所有基因表达载体的构建是完全相同的

A．②③ B．①④

C．①② D．③④

答案　B

解析　一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及报告基因等。由于目的基因的不同，所以构建的基因表达载体也是不同的。其中，启动子是与RNA聚合酶结合的位点，控制着转录的开始；而终止子控制着转录的结束。

[能力提升]

7．有关基因工程的叙述，正确的是(　　)

A．限制性内切酶只在获取目的基因时才用

B．重组质粒的形成是在细胞内完成的

C．质粒都可以作为运载体

D．蛋白质的氨基酸排列顺序可以为合成目的基因提供线索

答案　D

8．小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因)后再重组表达。下列相关叙述正确的是(　　)

①设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列

②用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列

③PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶