(1)图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性核酸内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。在质粒上有酶Ⅰ的1个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

　　①请画出质粒被限制性核酸内切酶Ⅰ切割后形成黏性末端的过程。

　　②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制性核酸内切酶切割后形成的黏性末端能否连接起来？________，理由是_______________________________________________。

　　(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是________。

　　(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_________________________________。

　　获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是________________________。

　　(4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：____________(用序号表示)。

　　①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列　②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计　③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)　④表达出蓝色荧光蛋白

答案

　　1．选B　蛋白质工程被称为第二代基因工程，是对基因结构进行相应地改造，从而产生新的蛋白质，对蛋白质直接改造，改造后不能够遗传，也不能大量生产。

　　2．选D　蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求。因此，归根到底，还是要对基因进行改造。

　　3．选D　通过修改已知蚕丝蛋白的基因，从而创造出全新的蛋白质的过程属于蛋白质工程技术，其设计原理是：蛋白质→RNA→DNA→RNA→蛋白质。

　　4．选D　蛋白质工程的基本途径是根据中心法则反推出来的。

　　5．选C　利用基因工程的方法对蛋白质进行改造，根据蛋白质被改造部位的多少，可以将蛋白质的改造类型分为"大改"、"中改"和"小改"三种。

6．选B　题目中的操作中涉及的基因显然不再是原来的基因，其合成的β­干扰素也