待压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子。B项，倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是完全取下放到一边。C项，接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后再挑取菌落。D项，在微生物的培养中，一般将培养皿倒置，在皿底上用记号笔做标记。

　　4．下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是(　　)

　　A．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行

　　B．步骤①中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖

　　C．步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灭菌处理

　　D．划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养

　　解析：选B。由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A正确；倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，B错误；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落，C正确；划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，D正确。

　　5．如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是(　　)

　　A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌

　　B．划线操作应在火焰上进行

　　C．在5区域中才可以得到所需菌落

　　D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

解析：选D。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰旁进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即