C．DNA聚合酶只能使DNA链从引物的3′端开始向引物的5′端延伸

　　D．引物的3′端必须具有游离的-OH基团

　　解析：选C。引物结合在模板链的3′端，DNA聚合酶只能使DNA链从引物的5′端开始向引物的3′端延伸。

　　13．PCR技术是一种DNA的扩增技术，操作步骤简介如下：

　　第一步：准备反应式溶液和模块DNA。

　　①配制聚合酶链式反应溶液：

　　配方：按如下比例进行配制：蒸馏水100、缓冲溶液15、氯化镁溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、矿物油1(防止聚合酶在冻结时受伤害)；dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一种各加5。

　　②准备要拷贝的DNA：

　　提取准备要拷贝的DNA(如可以用一牙签轻刮口腔内壁，将牙签放入蒸馏水中摇动。加热蒸馏水沸腾，使细胞破碎放出DNA。用离心机离心后，去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的DNA。)

　　第二步：聚合酶链式反应。

　　①将要拷贝的DNA"B"放入反应液"A"中。

　　②水浴加热。首先，94 ℃，使DNA双螺旋解旋，历时1 min；然后，56 ℃，使引物结合到DNA上，历时90 s；最后，72 ℃，用聚合酶使DNA拷贝，历时90 s。

　　③重复步骤②。每重复一次，即完成一次拷贝。

　　分析回答下列问题：

　　(1)以上材料可以说明(　　)

　　A．DNA的复制必须在活细胞内才能完成

　　B．DNA能指导蛋白质的合成

　　C．在合适的条件下，非细胞环境也能进行DNA复制

　　D．PCR技术是一种无性生殖技术

　　(2)为什么要加入两种引物。________________________________________________________________________

　　________________________________________________________________________

　　________________________________________________________________________。

　　引物的作用是什么？________________________________________________________________________。

　　(3)PCR技术中用到的DNA聚合酶，取自生长在温泉中的一种细菌，就PCR技术来讲，你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是________________________________________________________________________。

　　解析：在PCR技术中，催化合成DNA子链的DNA聚合酶的活性是扩增的关键因素之一。最初，PCR反应用的是E·coli DNA聚合酶，但这种酶在94 ℃双链DNA解旋时被破坏，因此每个循环都要重新加酶，造成操作繁琐、反应低效及费用增加。后来发现温泉中的细菌DNA聚合酶能在高温下很好地工作，这个发现推动了PCR的发展。水生栖热菌生活在75 ℃的温泉中，它的DNA聚合酶(Taq聚合酶)的最适温度是72 ℃，并且在94 ℃相当稳定，这种酶在95 ℃下半衰期长达38 min。Taq聚合酶只需要在反应开始时加一次就能在整个扩增循环中保持活性，这样，就可通过编程控制PCR循环仪的反应温度和反应时间，使PCR完全自动化。

　　答案：(1)C　(2)DNA分子两条链是呈反向平行的，DNA聚合酶不能从头合成DNA分子，只能从3′端到5′端延伸，而引物也是一段核苷酸序列，与DNA分子双链中的一条链互补　引导DNA分子的复制　(3)较高温下不会变性失活

14．PCR是一种选择性体外扩增DNA片段的方法。其特异性是由两个人工合成的引物序列决定的。所谓引物就是与待扩增DNA片段两翼互补的寡聚核苷酸。待扩增DNA模板加热变性后，两引物分别与两条DNA的两翼序列退火。此时，两引物的3′端相对，5′