一、基因工程

　　1．基因工程概念的理解

　　2．基因工程的诞生和发展

　　(1)基础理论的重大突破

　　①DNA是遗传物质的证明。

　　②DNA双螺旋结构和中心法则的确立。

　　③遗传密码的破译。

　　(2)技术发明使基因工程的实施成为可能

　　①基因转移载体和工具酶相继发现。

　　②DNA合成和测序技术的发明。

　　③DNA体外重组得到实现，重组DNA表达实验获得成功。

　　(3)基因工程的发展与完善

　　①1980年，科学家首次培育出世界上第一个转基因小鼠。1983年，世界上第一例转基因烟草培育成功，基因工程进入迅速发展阶段。

　　②1988年 PCR技术的发明，使基因工程技术得到了进一步发展和完善。

　　二、DNA重组技术的基本工具

　　1．限制性核酸内切酶(限制酶)--"分子手术刀"

　　(1)来源：主要从原核生物中分离纯化出来。

　　(2)作用

　　①识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列。

　　②切割特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

　　(3)作用结果：产生黏性末端或平末端。

　　2．DNA连接酶--"分子缝合针"

　　(1)作用：恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，拼接成新的DNA分子。

　　(2)种类

种类

项目 E·coli DNA连接酶 T4DNA连接酶