一、蛋白质提取与分离的原理和方法

　　1．蛋白质分离的原理

　　根据蛋白质各种特性的差异分离蛋白质，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等。

　　2．凝胶色谱法

　　(1)概念：也称做分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。

　　(2)原理

　　3．缓冲溶液

　　(1)作用：在一定范围内，缓冲溶液能抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持 pH基本不变。

　　(2)配制：通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成，调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液。

　　4．电泳

　　(1)概念：带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。

　　(2)原理：

　　电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。

　　二、血红蛋白提取和分离的实验操作

　　蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

　　1.样品处理

　　红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液

2．粗分离--透析