课时1 DNA的粗提取与鉴定
一、实验目的:
初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。
二、实验原理:
1.DNA的溶解性:
思考题1:DNA在氯化钠溶液中的溶解度有什么特点?对此有什么应用?
思考题2:利用什么原理来将DNA与蛋白质分离开?
2.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:蛋白酶能水解 ,但对 没有影响
大多数蛋白质不能忍受 ℃的高温,而DNA在 ℃以上才会变性。 能够瓦
细胞膜,但对DNA没有影响。
3.细胞在 中易吸水而导致细胞膜和细胞核膜的破裂,据此可得到含有核DNA的溶液。
4.DNA的鉴定:
思考题3:依据什么原理来鉴定DNA?
三、实验材料:鸡血细胞液
思考题4:生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,他们能否选用牛、羊、马血做
实验材料?为什么?
四、实验步骤:
1.制备鸡血细胞液:在鸡血中加入质量浓度为0.1g/mL的 溶液,离心处理;
2.提取鸡血细胞的细胞核物质:向鸡血细胞液中加入蒸馏水,搅拌、过滤;
思考题5:加入蒸馏水的目的是什么?为什么能达到此目的?
3.溶解细胞核内的DNA:加入2mol/L的氯化钠溶液,搅拌,使DNA呈溶解状态;
4.析出含DNA的黏稠物:加入蒸馏水,用玻璃棒搅拌;
思考题6:此时加入蒸馏水的目的是什么?