课题1微生物的实验室培养

【课程目标】

　　了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。

【课题重点】

　　无菌技术的操作

【课题难点】

　　无菌技术的操作

基础知识

一、培养基

　　1．概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其 的营养基质叫培养基。可分为 培养基和 培养基。

　　 2．营养构成：各种培养基一般都含有 、 、 和 ，此外还要满足微生物生长对 、 以及 的要求。

　　3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加 、培养霉菌时需将培养基PH调至 、培养细菌时需将PH调至 、培养厌氧微生物则需提供 条件。

　　〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？

　　【补充1】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。

　　氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。

二、无菌技术：阅读"无菌技术"，讨论回答下列问题：

　　 (一)获得纯净培养物的关键是 ，具体操作如下：

1．对实验操作的 、操作者的 和 进行 。

2．将用于微生物培养的 、 和 等器具进行 。

3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 附近进行。

　　4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。

(二)消毒和灭菌

　　1．消毒是指 。常用的方法有 、 、 消毒法。

　　2．灭菌是指 。常用的方法有： 、 、 灭菌。分别适用于那些用具？

　　〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？

　　〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？

　　〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是 ；随后关闭排气阀继续加热，气压升至 ，温度为 ，并维持 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至 时打开锅盖，其目的是防止