一、PCR技术的原理

　　1．细胞内DNA复制的条件(填表)

原料 4种脱氧核苷酸 模板 2条DNA母链 酶 解旋酶和DNA聚合酶 引物 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 　　2.PCR扩增的原理及条件

　　(1)PCR(即多聚酶链式反应)：一种体外迅速扩增 DNA片段的技术。它能以极少量的 DNA为模板，在短时间内复制出上百万份的DNA拷贝。

　　(2)扩增方向：DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从端延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物，DNA的合成方向总是从子链的端向端延伸。

　　(3)PCR的原理：DNA的热变性原理，在80～100 ℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开，这个过程称为变性。当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链。

　　(4)反应条件：一定的缓冲溶液、DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶，及能自动调控温度的仪器。

　　二、PCR的反应过程

　　1．变性：温度上升到 ℃以上时，双链DNA解聚为单链。

　　2．复性：温度下降到50 ℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。

　　3．延伸：温度上升到72 ℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在 DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新DNA链。

　　三、实验操作及DNA含量的测定

　　1．实验操作程序

―→―→―→―→