第39讲　无菌操作技术实践

[考纲要求]　1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。

考点一　微生物的分离和培养

1.相关技能、技术和方法

(1)无菌操作的技能

①干热灭菌法是指将准备灭菌的物品放在干热灭菌箱内，在160～170 ℃下加热1～2 h以达到灭菌的目的。

②湿热灭菌法常采用高压蒸汽灭菌锅进行，其使用包括加水、装锅、加热排气、保温保压、出锅等步骤。

(2)培养基的配制

①培养基的概念：是为人工培养微生物而制备的适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。

②营养组成：一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐等最基本的物质。此外，根据拟培养的微生物的不同需要，有时还要加入维生素等特殊的营养物质，并要调节培养基的pH使之满足微生物生长的需要。

③种类：天然培养基和合成培养基，前者的主要优点是取材便利、营养丰富、配制简便，缺点是营养成分难以控制、实验结果的重复性较差；后者的优点是化学成分及其含量明确，实验的可重复性好，缺点是配制繁琐、成本较高。

(3)微生物的接种

①接种：是指在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。

②常用的工具有玻璃涂布器、接种针、接种环等，在涂布平板接种时要用玻璃涂布器，穿