生物选修三复习导学提纲（一）

专题一 基因工程

第一课时 1.1 DNA重组技术的基本工具

1.2 基因工程的基本操作程序

【课前导学】

1．1 DNA重组技术的基本工具

　　一、基因工程的原理：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 和 ，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在 水平上进行设计和施工的，因此又叫做 。

　　二、限制性核酸内切酶

1、切割DNA的工具是 ，又称 。

2、这类酶在生物体内能将外来的DNA切断，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保持细胞原有的遗传信息。

3、由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶（简称限制酶）。

4、DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段，末端通常有两种形式，即 和 。

　　三、DNA连接酶--"分子缝合针"

　　根据DNA连接酶的来源不同，可以将它分为两类：

　　一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为DNA连接酶。DNA连接酶只能将 连接起来，不能将双链DNA片段平末端之间进行连接。

　　另一类是从 分离出来的，称为T4DNA连接酶。T4DNA连接酶既可以"缝合"双链DNA片段互补的 ，又可以"缝合"双链DNA片段的 ，但连接 之间的效率比较低。

　　四、基因进入受体细胞的载体--"分子运输车"

　　1、基因操作过程中使用载体两个目的：一是用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去；二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。

　　2、现在通常使用的载体是 ，它是一种相对分子质量较小、独立于拟核DNA之外的环状DNA，有的细菌中有一个，有的细菌中有多个。

　　3、质粒通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移，可以 复制，也可整合细菌拟核DNA中，随着拟核DNA的复制而复制。

　　4、其他载体还有 和 等。

　　5、作为载体必须具备以下条件：

　　能够在宿主细胞中复制并稳定地保存；

　　具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接；

　　具有某些标记基因，便于进行筛选，如对抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。

1．2 基因工程的基本操作程序

　　一、目的基因的获取：

　　1、目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的 。

　　2．获取目的基因的方法

　　（1）从基因文库中获取目的基因

① 基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 ，导人受体菌的群体中