2019-2020学年 人教版 选修1DNA的粗提取与鉴定 教案
学习目标 1.掌握提取并鉴定DNA的原理和方法。2.掌握DNA粗提取的选材、析出及鉴定。3.掌握实验过程中需注意的问题。4.掌握DNA粗提取与鉴定的技术。
一、DNA的理化特性、提取及鉴定的原理
1.提取DNA的方法和原理
(1)提取生物大分子的基本思路:选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
(2)提取DNA的方法:利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
2.DNA的溶解性
(1)DNA在NaCl溶液中的溶解度
DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,其中在0.14_mol/LNaCl溶液中溶解度最低。
(2)DNA在酒精溶液中的溶解性:DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液。
3.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
(1)对酶的耐受性:蛋白酶能水解蛋白质,但对DNA没有影响。
(2)对温度的耐受性:大多数蛋白质不能忍受60~80_℃的高温,而DNA在80_℃_以上才会变性。
(3)对洗涤剂的耐受性:洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
4.DNA的鉴定
在沸水浴的条件下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色。
特别提醒 (1)二苯胺试剂要现配现用,鉴定时,溶液蓝色的深浅与溶液中DNA含量的多少有关。
(2)DNA的鉴定一般用二苯胺,而在观察细胞中DNA的分布时,则用甲基绿作为DNA的染色剂,但甲基绿在使用时需与能使RNA呈现红色的吡罗红混合使用。