课题3 分解纤维素的微生物的分离

考点要求

　　1．能简述纤维素酶的种类及作用，

　　2．能从土壤中分离出分解纤维素的微生物，了解这类微生物的应用。

3．能掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。

双基过关

一、纤维素与纤维素酶

1．纤维素的化学组成： 三种元素，是一种 糖。

2．纤维素的分布： 是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。

3．纤维素酶的作用：纤维素酶是一种 ，一般认为它至少包括三种组分，即 酶、 酶 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。

二、纤维素分解菌的筛选 1．筛选方法： 染色法。

2．筛选原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的透明圈，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。

三、试验设计

土壤中纤维素分解菌的分离的实验方案 ： 分解纤维素的微生物的分离的试验流程

、 、 、 、

1．土壤取样：采集土样时，应选择富含 的环境。

2．选择培养： 阅读资料二"选择培养基"，回答以下三个问题：

〖思考1〗纤维素分解菌选择培养基属于 培养基，原因是什么？。

〖思考2〗培养基选择作用机制是什么？

〖思考3〗若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是什么？

(1)目的：增加纤维素分解菌的 ，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。

(2)制备选择培养基：参照课本旁栏中的比例配制。

(3)选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在 上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变 。也可重复选择培养。

（4）梯度稀释： 依次将培养液稀释101～107倍。思考是如何操作的？

　(5)．将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

　<1>制备培养基：参照课本旁栏中的比例。 <2>倒平板操作。 <3>涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0．1 mL涂布在平板培养基上，30℃倒置培养。

(6)．刚果红染色法：挑选产生 的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。

〖思考4〗本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？

3刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种即

。

阅读资料三"刚果红染色法"，填表比较两种染色法的各自的优缺点

是 、 。

阅读资料三"刚果红染色法"，填表比较两种染色法的各自的优缺点：