课题2　

　　多聚酶链式反应扩增DNA片段

　　1．理解PCR的原理。(重点)

　　2．体验PCR这一常规的分子生物学实验的方法。(难点)

　　3．了解PCR的应用。(重点)

　PCR 扩 增 的 原 理 和 过 程 　　

　　1．细胞内DNA复制过程的解析

　　解旋：在解旋酶作用下，DNA两条链打开，形成两条DNA单链

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　　引物结合：在DNA单链3′端，通过碱基互补配对与DNA母链结合

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　　DNA聚合酶结合：DNA聚合酶与模板链结合，标志着单链合成开始

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　　子链合成：DNA聚合酶从引物3′端开始，将配对的脱氧核苷酸连接起来

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　　后续加工：将引物切去，并合成空缺处的DNA单链，再由DNA连接

　　　　　　　酶将不连续的DNA子链连接起来，子链和母链再形成

　　　　　　　双螺旋结构

　　2．PCR技术的原理

(1)PCR技术：即多聚酶链式反应，是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。