课题3 血红蛋白的提取和分离

一、学习目标：

　　本课题尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，使学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法，电泳法等分离生物大分子的基本原理，为今后学习运用这些技术打下基础。

二、重点：

　　凝胶色谱法的原理和方法

三、难点：

　　样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。

【基础梳理】

一、凝胶色谱法

　1、概念：也称做 ；是根据 分离蛋白质的有效方法。

2、原理

（1）由 构成的凝胶，内部有许多贯穿的的 。

（2）当 不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量 的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程 ，移动速度 ，而相对分子质量 的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在 移动，路程 ，移动速度 ，从而使 不同的蛋白质分子得以分离。

二、缓冲溶液

1、作用：在一定范围内，抵制 的 对溶液pH的影响，维持pH 。

　2、配制：由 种缓冲剂溶解于 中配制而成，通过调节缓冲剂的 就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。

三、电泳

　1、概念：指 在电厂的作用下发生 的过程。

　2、原理：在一定的 下， 、 等生物大分子的可解离基团会带上

　 或 ，在 的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷 的电极移动。

3、作用：电泳利用了待分离样品中各种分子 的差异及分子本身的 、

的不同，使带电分子产生不同的 ，从而实现样品中 的分离。