第一节 生物成分的分离与测定技术
第1课时 蛋白质的分离与提取
学习导航 明目标、知重点难点 掌握电泳法分离大分子的原理。(重点)
运用常用的方法提取和分离蛋白质。(重、难点)
[学生用书P48]
一、阅读教材P71~72分析蛋白质的分离与纯化
1.生物细胞中的蛋白质提取
(1)在提取蛋白质时,可以采用研磨与超声波结合的方法将生物组织或细胞完全破碎,使蛋白质从细胞中释放出来,并使其溶解在适当的抽提液中。
(2)抽提液的选择需要根据蛋白质的特性而定,一般酸性蛋白质用偏碱性溶液抽提,碱性蛋白质用偏酸性溶液抽提,脂蛋白等则可用有机溶剂抽提。
2.蛋白质的分离方法
(1)离心沉降法:通过控制离心速度,使分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层。
(2)薄膜透析法:利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性,使蛋白质与其他小分子化合物分离的方法。
(3)凝胶色谱法
①概念:根据蛋白质分子量的大小差异对其进行有效分离的方法。
②原理
a.凝胶
b.分离的过程
进入凝胶颗粒内
部的难易程度 路程 移动速度