第三节测定微生物的数量

　　一、测定微生物数量的方法

　　测定微生物数量的方法可分为两类：直接计数法和间接计数法。前者常用的是显微镜直接计数法，这种方法是先将待测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数。该方法适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。后者最常用的是稀释平板计数法，需要将待测样品配制成均匀的系列稀释液并使其均匀分布于平板中的培养基内，经培养后统计培养基中出现的菌落数，从而推算出样品中的活菌数。

　　利用血球计数板测出的菌体数与平板计数法相比哪个多些？

　　【提示】　血球计数板测出的是全部菌体数，而平板计数法只能测出活菌数，而且比实际数偏少。

　　二、间接计数法的实验设计

　　1．制备土壤稀释液

　　取土壤表层5～10 cm处的土样。准确称取1 g土样，放入盛有99 mL无菌水的锥形瓶中，振荡20 min后制成102倍的稀释液。然后进行系列稀释，得到103、104、105、106倍的系列稀释菌液。

　　2．取样及倒平板[]

　　3．培养

　　4．观察记录

　　(1)计数时对于细菌、放线菌以每个培养皿内有30～300个菌落为宜，霉菌以每个培养皿内有10～100个菌落为宜。

(2)计算每克样品菌数公式为：每克土壤样品菌数＝×稀释倍数。