第一节 酶的制备及活力测定

【课标要求】

研究酶的存在和简单制作方法，尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。

【知识梳理】

背景知识 1、酶在活细胞内合成，在细胞内起催化作用，称为________。

1、生物细胞产生的酶

　　　　　　　　　　　2、由细胞内产生然后分泌到细胞外发挥作用，称为________。

1、提取胞内酶，需要破碎________，可用破碎仪、研磨器或匀浆机

2、提取酶的方法 使酶从中释放出来，进入细胞外的溶液中，经过滤、离心制备成________。

　　　　　　　　 2、提取胞外酶，可直接从________________________中提取。

在酶的提取过程中，________、________等多种环境条件都可能影响酶的空间结构导致酶变性直至丧失活力。因而，提取出的酶首先需要检测酶的________。

（1）定义：通常以单位时间内________或者单位时间内________

3、酶的活力

　　　　　　　（2）测定方法：________和________

实践案例：植物淀粉酶的制备及活力测定

材料器具：略

活动程序：

1、提取酶液

2、滴加酶液：取4支试管编号后均加入PH=5.6的________________缓冲溶液。

向1、2试管中各加入未煮过的________ 1ml

向3、4试管中各加入已煮过的________ 1ml

3、恒温处理：为什么要进行恒温40°C处理？答：保证酶在________温度下充分发生反应。

4、钝化处理：钝化处理的原因？答：使酶的活性________，从而使反应减慢或停止。

5、测定吸光值：用分光光度计在波长________处进行比色。

6、绘制标准曲线

7、结果分析：（1）从标准曲线中查出________。

（2）计算淀粉酶的活力。

探究活动：

　　1、制备过氧化氢酶粗酶液

　　以新鲜________、________________为材料经过粉碎、研磨、离心，取________即可得到过氧化氢酶粗酶液。

　　2、用分光光度法测定过氧化氢酶的活力

　　在过氧化氢酶存在时，过氧化氢将愈创木酚氧化生成________色产物，这种产物在波长470 nm处有最大吸收峰，通过测定________可以计算出过氧化氢酶的活力。

　　3、用高锰酸钾滴定法测定过氧化氢酶的活力

如果在反应系统中加入________的过氧化氢溶液，经酶促反应后，在酸性条件下，用高锰酸钾溶液滴定________的H2O2，然后根据消耗的H2O2量计算出过氧化氢酶的活力。