(1)受精前的准备阶段:
① 精子获能: 精子必须在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后,才获得受精能力的生理现象,原因在于精清中含有一种能抑制精子获能的物质,只有当交配后精液进入雌性动物的生殖道时,由生殖道分泌产生一种物质解除对精子获能的抑制,才能引起精子获能。精子在雌性动物生殖道内获能的部位因种类而异,但主要是子宫和输卵管,卵泡液、输卵管分泌物、血清等液体可使精子获能。
② 卵子的准备: 在输卵管中发育到减数第二次分裂的中期(MⅡ期),才具有与精子受精的能力
(2) 受精阶段:
① 精子穿越放射冠和透明带
顶体反应:使顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内的卵丘细胞
透明带反应:防止多精入卵受精的第一道屏障
② 精子进入卵黄膜
卵黄膜封闭作用:防止多精入卵受精的第二道屏障
③ 原核形成: 雄原核形成和雌原核形成
④ 配子结合: 雌雄原核融合形成合子(受精卵)
(3)受精作用的场所:输卵管的壶腹部
(4)受精标志:第二极体的形成;受精完成标志是雌雄原核融合成合子。
(5)受精作用的结果:使单倍体的精子和卵子结合形成二倍体的受精卵,染色体数目恢复到体细胞中的数目,其中一半染色体来自父方,另一半来自母方。
(二)哺乳动物胚胎发育的基本过程
受精过程的完成,标志着胚胎发育的开始。
起点:受精卵;终点:幼体;包括以下几个阶段:
(1)卵裂期:细胞有丝分裂,细胞数量不断增加,但胚胎的总体体积并不增加,或略有减小。
(2)桑椹胚:胚胎细胞数目达到32个左右时,胚胎形成致密的细胞团,形似桑椹。是全能细胞。
(3)囊 胚:细胞开始出现分化(该时期细胞的全能性仍比较高)。聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团,将来发育成胎儿的各种组织。
(4)原肠胚:有了三胚层的分化,具有囊胚腔和原肠腔。
(三) 胚胎工程的主要技术与应用
对动物生殖细胞、受精卵和早期胚胎细胞所进行的多种显微操作和处理技术,由体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术、等组成的现代生物技术。
1.体外受精技术
是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术。
(1)基本原理:人工模拟体内环境,包括营养、温度、pH等,使初级卵母细胞成熟,同时使精子获能,最终完成受精作用,并有计划地保存胚胎等。
(2)卵母细胞的采集和培养: 对体型小的动物用促性腺激素处理,从输卵管冲取卵子(可直接受精);对体型大的动物从卵巢中采集卵母细胞(要在体外培养成熟)。
(3)精子的采集和获能:在体外受精前,要对精子进行获能处理。
(4)受精:获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
(5)胚胎的早期培养:精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养,以检查受精状况和受精卵的发育能力。培养液成分较复杂,除一些无机盐和有机盐外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清等物质。当胚胎发育