〖思考8〗倒平板的目的是什么？

　　〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？

　　〖思考10〗配制斜面培养基作用是什么？，试管为什么要加塞棉塞？

二、纯化大肠杆菌

　　 微生物接种：最常用的是 法和 法。另外还有穿刺接种和斜面接种等。

1．平板划线法是 的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

　　其操作步骤是：①将 在酒精灯火焰上灼烧直至 。②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。③将菌种试管口通过火焰达到 的目的。④将冷却的接种环伸入到 。⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环 ，盖上皿盖，不要划破培养基。⑦灼烧接种环，冷却后从 划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将 相连。

　　⑧将平板 培养。

　　〖思考11〗取菌种前灼烧接种环的目的是什么？ 为什么除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环？ 取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是？

　　最后灼烧接种环的目的是？ 在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是？

2．稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将 进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。

　　　系列稀释操作：

　　①取盛有 mL水的无菌试管6支 ，编号101、102、103、104、105、106。

　　②用灼烧冷却的移液管吸取 mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次使之混匀。

③从101倍液中吸取 mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。依此类推。