胡萝卜素 橙黄色 叶黄素 黄色 (2)纸层析法分离色素的原理
菠菜的叶绿体中所含的四种色素都能溶于乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂中,所以可用有机溶剂提取叶绿体中的色素。叶绿体中的色素在展开剂中的溶解度不同,溶解度大的色素随展开剂在滤纸上扩散的速度快,溶解度小的色素随展开剂在滤纸上扩散的速度慢,所以可用纸层析法将色素分离。
实验方案
(1)提取色素
取5 g菠菜,剪碎放于研钵中,加2 mL丙酮、细沙和少量碳酸钙,迅速充分研磨成浆液,并用干净纱布提取滤液。
(2)画滤液细线
取一张预先处理好的滤纸条,在距滤纸的一端约2 cm处,用毛细管吸取色素滤液画一条细线,反复操作3~5次,晾干。
(3)配制展开剂
将石油醚、丙酮、苯按一定比例配成混合溶液。
(4)层析操作
将3 mL展开剂倒入烧杯中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)略微斜靠着烧杯的内壁,轻轻插入展开剂中。2 min~3 min后,滤纸条上出现4条色素带,从上到下依次是橙黄、黄、蓝绿和黄绿色。四种色素在滤纸上扩散的速度大小为:胡萝卜素>叶黄素>叶绿素a>叶绿素b。
2.影响叶绿体中色素的层析实验效果的因素有哪些?
【提示】 (1)取材。材料中叶绿体色素的含量大小和材料的用量,要选取鲜嫩、颜色浓绿、无浆汁的叶片。
(2)提取溶剂的选择。一种合适的提取剂,不仅要考虑其提取效果,而且还要考虑经济节约、操作容易及污染程度小等方面。
(3)滤纸。选择一种适于观察且又容易操作的滤纸,以层析滤纸为好,若无层析滤纸,也可选用质量均一、平整、纸纹一致的干净滤纸代替;裁剪时要将滤纸按纤维长丝方向剪裁,确保展开剂按纵向流动。
(4)展开剂。寻找一种有利于色素迅速扩散的展开剂。另外,水分的存在以及胶体的