第2课时　分离以尿素为氮源的微生物

知识内容 要求 考情解读 分离以尿素为氮源的微生物 掌握程度参考实验与探究能力 1.进行微生物分离。使用含有尿素的培养基，采用涂布分离法，分离有脲酶的细菌。

2.使用酚红指示剂检测以尿素为氮源的细菌的存在。

3.说明分离以尿素为氮源的细菌的实验原理。

4.举例说明本实验分离出来的细菌不一定都是以尿素为氮源的细菌。

一、实验目的、原理

1．实验目的

(1)使用专一的培养基(含有尿素)分离专一的细菌(有脲酶的细菌)。

(2)利用指示剂颜色的变化检知酶(脲酶)所催化的反应。

2．实验原理

(1)不同微生物利用的氮源种类不同，有一些细菌含有脲酶，通过降解尿素作为其生长的氮源。

(2)尿素在脲酶的作用下降解产生NH3，使培养基的pH升高，于是培养基中的酚红指示剂变成红色。

思考　能在选择培养基上生长的肯定是所筛选的细菌吗？

答案　原则上选择培养基只能允许特定种类的微生物生长，但实际上，微生物的培养是一个非常复杂的过程。有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长和繁殖，因此能在选择培养基上生长的微生物不一定都是所需的微生物，还需要进一步验证。

探究1--注重方法

1. 酚红指示剂的选择

本实验中，酚红作为酸碱指示剂被添加到了培养基中，其变色的pH范围是6.4～8.2，在酸性情况下呈黄色，碱性情况下呈红色。

以尿素为氮源的微生物培养一段时间后，由于细菌产生的脲酶向周围扩散，将培养基中的尿素分解，产生的NH3使培养基的pH升高变成碱性，于是培养基中的酚红指示剂变成红色