【基础知识】答案
一、基础知识
(一)植物组织培养的基本过程
1.细胞分化
(1)形态、结构、生理功能。
(3)特点:①胚胎。②不可逆转。
(5)原因:基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达。
2.细胞全能性
(3)实例:细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质。
3.植物组织培养
(3)相关概念:
①外植体:从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官。
②脱分化:产生愈伤组织。
④愈伤组织:细胞排列疏松而无规则。
(二)影响组织培养的因素
1.外植体的选取:未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
3.不同植物激素浓度,使用顺序和使用量
先细胞分裂素,后生长素,细胞既分裂也
分化比值低时,促芽分化,抑根形成
4.消毒:无菌。
5.pH、温度、光照:pH=5.8;温度18-22℃;照射12。
二、实验操作
(一)MS固体培养基制备
1.配置各种母液:①10倍,微量元素浓缩100倍,常温保存。
(二)外植体消毒
2.消毒:② 酒精处理: 2-3次, 6-7s。③消毒液处理: 3次。
(三)接种
2.无菌操作要求:酒精灯火焰旁;用火焰灼烧灭菌;盖好瓶盖。
4.接种注意事项
②胡萝卜3-4块,菊的茎或叶6-8块。
③方向,不要倒插;吸收水分和养分。
思考:应该做几组重复、设置几组对照实验?
答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。
(四)培养
1.愈伤组织的培养:继代培养。
2.愈伤组织的继代培养:1-1.5。