1．制备固定化酵母细胞的实验操作(填表)

步骤 主要操作 酵母细胞的活化 1 g干酵母＋10 mL蒸馏水→放入50 mL烧杯中→玻璃棒搅拌，使之混合均匀→放置1 h左右，使其活化 配制0.05 mol/L的CaCl2溶液 0.83 g无水CaCl2＋150 mL蒸馏水→放入200 mL烧杯中→溶解备用 配制海藻酸钠溶液 0.7 g海藻酸钠＋10 mL水→放入50 mL烧杯中→酒精灯小火(或间断)加热，并不断搅拌，使之溶化→用蒸馏水定容至10 mL 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中 固定化酵母细胞 以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，形成凝胶珠，并浸泡30 min左右 用固定化酵母细胞发酵 将凝胶珠用蒸馏水冲洗2～3次，加入到葡萄糖溶液中，置于25 ℃下发酵24 h 　　2.酵母细胞固定化实验的易混点

　　(1)酵母细胞固定前要活化，原因：使处于休眠状态的酵母细胞恢复正常的生活状态。

　　(2)在制备固定化酵母细胞过程中，CaCl2溶液使海藻酸钠胶体发生聚沉，形成凝胶珠。

　　(3)在配制海藻酸钠溶液时，小火加热并不断搅拌的目的：防止海藻酸钠焦糊。

　　(4)已溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温再加入已活化的酵母细胞，防止高温杀死酵母细胞。

　　(5)酵母菌的酒精发酵需要无氧条件，所以发酵时锥形瓶要密封。

　　[总结升华]

　　1．制备固定化酵母细胞的注意事项

　　(1)酵母细胞活化时体积会变大，因此活化前应该选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出。

　　(2)加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，关系到实验的成败，一定要按照教材的提示进行操作。加热时要用小火，或者间断加热，反复几次，直到海藻酸钠溶化为止。

　　(3)海藻酸钠的浓度关系到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。

　　(4)固定化酵母细胞时，应将海藻酸钠与酵母细胞的混合液用注射器缓慢滴加到CaCl2溶液中，而不是注射，以免影响凝胶珠的形成。

(5)海藻酸钠胶体在CaCl2这种电解质的作用下，发生聚沉，形成凝胶珠，需浸泡30 mi