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离心:将微量离心管放在离心机上,离心约10 s。目的是使反应液集中在离心管底部
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反应:将离心管放入PCR仪中,设置程序进行反应
(3)实验操作注意事项
①为避免外源DNA等因素的污染,实验中使用的一些用具在使用前必须进行高压灭菌。
②所用的缓冲液和酶应分装成小份,并在-20_℃储存。
③在微量离心管中添加反应成分时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头必须更换。
(4)DNA含量的测定
①原理:利用DNA在260_nm的紫外线波段的吸收峰曲线来测定相应含量。
②计算公式:
DNA含量(μg/mL)=50×(260_nm的读数)×稀释倍数。
1.判断对错
(1)PCR技术利用的是碱基互补配对原则。 ( )
(2)PCR技术可用于基因诊断、判断亲缘关系等。 ( )
(3)PCR技术需在体内进行。 ( )
(4)PCR技术可能为变性、复性、延伸三个阶段。 ( )
提示:(1)√ (2)√
(3)× PCR技术是聚合酶链式反应的简称,是在体外快速大量复制DNA片段的一种新技术。
(4)√
2.PCR技术控制DNA的解聚与结合是利用了DNA的( )
A.特异性 B.稳定性
C.热变性 D.多样性
C [DNA分子在80~100 ℃的温度范围内变性,双链解开成单链;当温度