(1)常用方法:稀释涂布平板法。
①原理
②计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M。
C:代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V:代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M:代表稀释倍数。
③注意事项
a.为了保证结果准确,一般设置三个平板,选择菌落数在30~300的平板进行计数,并取平均值。
b.统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。因此,统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。
c.设置对照:主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
(2)其他方法:利用显微镜直接计数。
探讨:根据选择培养基的原理,如何筛选出耐酸菌?
提示:可将培养基的pH调至酸性,再接种培养。
探讨:如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数?
提示:统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3个平板,计算出平板上菌落数的平均值,然后按照公式进行计算。
探讨:稀释涂布平板法和显微计数法对微生物计数产生的实验误差如何?试分析原因。
提示:稀释涂布平板法计数的值比实际值偏小,原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落;显微计数法计数的结果比实际值偏大,原因是显微镜下无法区分细胞的死活,计数时包括了死细胞。