（1）受体种类不同，导入方法不同

受体细胞种类 方法 植物细胞 （1）农杆菌转化法：目的基因插入Ti质粒的T-DNA→农杆菌→导入植物细胞→稳定维持和表达

（2） 基因枪法

（3） 花粉管通道法 动物细胞 显微注射法：目的表达载体提纯→取卵（受精卵）→显微注射→受精卵发育→新性状动物 微生物细胞 Ca2+处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 　　（2）受体种类不同，所用的受体细胞种类也不相同。

植物：可以是卵细胞（受精卵）、体细胞（可经组织培养成为完整个体）

动物：受精卵（因为体细胞的全能性受到严格限制）

　　（3）转化实质：目的基因整合到受体细胞染色体基因组中

4．目的基因的检测与表达

① 首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。

② 其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。

③ 最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。

④ 有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。

（三） 蛋白质工程

1．实质：根据蛋白质的结构与功能之间的关系，通过改造基因，以定向改造天然蛋白质，甚至创造自然界不存在的、具有优良特性的蛋白质。

2．基本原理：预期蛋白质功能→测定蛋白质三维空间结构→推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）→具有预期功能的蛋白质

3．应用

　　（1）通过改造酶的结构，有目的地提高蛋白质的热稳定性。

　　（2）合成嵌合抗体。

　　（3）改变蛋白质的活性。

（四）蛋白质工程与基因工程区别

蛋白质工程 基因工程 实质 通过改造基因，以定向改造天然蛋白质，甚至创造自然界不存在的蛋白质 将目的基因从供体转移到受体细胞，并在受体细胞中表达 结果 合成自然界不存在的蛋白质 只能生产自然界已存在的蛋白质 联系 蛋白质工程是在基因工程基础上，延伸出的第二代基因工程 典例精析

【例1】（2009·浙江理综）下列关于基因工程的叙述，错误的是

　　A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物

　　B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶

　　C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性

D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达