恢复螺旋：在 ℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。

　　复制条件： 。

　　反应场所： （自动温度周期性调节）。

［思考］缓冲液相当细胞内的什么成分？（核基质）

4．PCR的反应过程

　　变性：在 ℃时DNA解旋

复性：在 ℃时引物与DNA单链结合

延伸：在 ℃时合成DNA子链（两个引物间的序列）

　　Ⅱ．实验操作

（1） PCR反应体系：缓冲液、 ， 、 、两种RNA引物，水

（2） 实验操作步骤

①按照PCR反应体系配方配制反应液；

②将PCR反应体系50μL用微量移液器转移到微量离心管（0.5mL）中；

③将微量离心管放到PCR仪中；

④设置PCR仪的工作参数。

⑤DNA在PCR仪中大量扩增。

　　2．4 水浴法：将微型离心管依次在 ℃、 ℃、 ℃的恒温水浴锅中循环处理相应时间。

　　3．实验注意事项

　　（1）避免外源DNA污染：所用仪器、缓冲液、蒸馏水等使用前高压灭菌。

　　（2）缓冲液和酶分装成小份，－20℃低温保存。

　　（3）每添加一种反应成分，更换一个移液器的枪头。

　　（4）混匀后离心处理，使反应液集中在离心管底部。