1、基因的"剪刀"--限制性核酸内切酶（简称限制酶）

　　（1）存在：主要在微生物体内。

　　（2）特性：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。

　　（3）实例：EcoRI限制酶能专一识别GAATTC序列，并在G和A之间将这段序列切开。

　　（4）切割结果：产生2个带有黏性末端的DNA片断。

　　（5）作用：基因工程中重要的切割工具，能将外来的DNA切断，对自己的DNA无损害。

　　2、基因的"针线"--DNA连接酶

　　DNA连接酶的作用是在DNA分子连接过程中，黏合脱氧核糖和磷酸之间的缺口。如果把DNA分子看成"梯子形"，DNA连接酶的作用是把梯子的扶手连接起来。

　　3、常用的运载体--质粒

　　（1）本质：是能够自主复制的小型DNA分子，存在于细菌和酵母菌的细胞质中。

　　（2）作用 ①作为运载工具，将目的的基因送到宿主细胞中去。

　　　　　　　　②用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。

　　（3）条件 ①能在宿主细胞稳定保存并大量复制

　　　　　　　　②有多个限制酶切点。 ③有标记基因。

　　分析拓展 DNA聚合酶是把单个的脱氧核苷酸连接成DNA片断；DNA连接酶把DNA片连接成DNA分子，两者都是连接脱氧核糖和磷酸之间的磷酸二酯键。

　　学习检测2、质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是（ ）

　　①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构很小 ④蛋白质 ⑤环状RNA ⑥环状DNA ⑦能"友好"地"借居"

　　A、①③⑤⑦ B、②④⑥ C、①③⑥⑦ D、②③⑥⑦

　　学习检测3、下列能说明目的基因完成了表达的是（ ）

　　A、棉株中含有杀虫蛋白基因 B、大肠杆菌中具有胰岛素基因

　　C、土豆含有抗病毒的基因 D、从酵母菌中提取到了干扰素

　　三、基因工程的步骤

　　（1）__________；（2）目的基因与___________________结合；（3）将目的基因导入受体细胞；（4）__________。

具体步骤：