2、色谱柱填料的处理:商品凝胶使用前需直接放在 中膨胀,可以将加入其中的
用 加热,加速膨胀。
3、凝胶色谱柱的装填:在装填凝胶柱时,不得有气泡存在。气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的 ,降低 。
4、蛋白质的分离:如果红色区带 地移动,说明色谱柱制作成功。
【探究归纳】
一、人们用鸡的红细胞提取DNA,而用人成熟的红细胞提取血红蛋白的原因是什么?
二、洗涤红细胞时为什么不能用蒸馏水代替生理盐水?
三、在血红蛋白释放过程中。加入蒸馏水和甲苯的目的是什么?
四、凝胶色谱法的原理归纳
【典例导析】
类型一 凝胶色谱法分离蛋白质
【例l】凝胶色谱技术是一种快速而又简单的分离技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果,目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用,不但应用于科学实验研究,而且,已经大规模地用于工业生产。据图回答问题:
(1)a、b均为蛋白质分子,其中先从层析柱中洗脱出来的是 ,原因是
。
(2)自己制作凝胶色谱柱时,在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由
替代。
(3)装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存在,原因是 。
(4)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体 (填"相同"或"不同"),洗脱时,对洗脱液的流速要求是 。
【思路点拨】用凝胶色谱技术分离各种大分子物质时,大分子物质先洗脱出来,然后是小分子物质。大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布于颗粒之间,