2018-2019学年高二生物人教版选修一讲义:专题五 课题3 血红蛋白的提取和分离 Word版含答案
2018-2019学年高二生物人教版选修一讲义:专题五 课题3 血红蛋白的提取和分离 Word版含答案第3页

 相对分子质量大 相对分子质量小 运动路径 凝胶外部 凝胶内部 运动方式 垂直向下运动 无规则的扩散运动 运动路程 较短 较长 运动速度 较快 较慢 洗脱次序 先流出 后流出   2.电泳

  (1)原理

  ①许多重要的生物大分子,如多肽、核酸等具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团会带上正电或负电。

  ②在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。

  ③电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。

  (2)常用方法

  ①琼脂糖凝胶电泳:琼脂糖本身不带电荷,由于各种分子带电性质的差异、分子大小和形状的不同,在电场中迁移速度不同,从而得以分离。

  ②聚丙烯酰胺凝胶电泳

  在测定蛋白质分子量时通常使用SDS­聚丙烯酰胺凝胶电泳。SDS能使蛋白质发生完全变性,解聚成单条肽链,因此用该方法测定的结果只是单条肽链的分子量。

  SDS能与各种蛋白质结合形成蛋白质­SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。

  

  [总结升华]

  凝胶色谱法和电泳法的比较

凝胶色谱法 电泳法 分离依据 相对分子质量大小 分子带电性质差异、分子大小和形状等 分离动力 重力 电场力 分子大小

的影响 相对分子质量大,移动速度快 分子大,阻力大,移动速度慢   

  [对点演练]

1.使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中,相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进