② 培养基的成分：（半）固体培养基，主要是矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素等。

③ 特点：

Ⅰ 外植体的选择：花和幼嫩的组织脱分化较为容易，而植物的茎、叶和成熟的老组织则较难。另外制备外植体时应选取有形成层的部分，因为形成层细胞易脱分化。

Ⅱ 严格的无菌条件：培养基上有细菌等微生物存在时，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此在培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。

Ⅲ 完全的营养条件：离体的植物细胞失去了植物的自养能力，所以需要为其提供包括水、有机营养、矿质营养、维生素等营养物质。

Ⅳ 光照：离体的植物细胞、组织和器官脱分化形成愈伤组织时，需避光处理；而愈伤组织再分化形成植物幼苗时，需光照处理。

Ⅴ 激素调控：生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织脱分化和根原基的形成；当细胞分裂素的效应高于生长素时，主要诱导植物组织再分化和芽原基的形成。

④ 地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。

（2） 植物体细胞杂交技术

① 原理：细胞膜的流动性、植物细胞的全能性

② 过程

关键环节：

A．用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，

获得有活力的原生质体；

B．原生质体间的融合：

融合方法：物理法（离心、振动、

　　　　　　　　　　　　　电激）

化学法（聚乙二醇PEG）

　③ 植物细胞杂交与传统细胞杂交比较：

传统杂交 细胞杂交 依据 杂种优势 细胞全能性、原生质体融合 过程 自然发生，在母体完成胚发育 人工诱导融合，需组织培养 本质 精、卵两种生殖细胞结合，完成遗传物质的重新组合 不同生物的体细胞融合，完成遗传物质的融合 优点 杂种第一代生长整齐、植株健壮、产量高、抗虫抗病能力强 克服远源杂交不亲和障碍，实现不同种间的杂交 缺点 存在生殖隔离；杂种第二代会出现生长不齐、产量下降等现象 很多理论、技术问题未解决，距离推广应用有一定差距 目的 获得杂种优势，提高产量 获得优良性状 应用范围 种内 种内、种间均可 　　　　　　　　　　

3．植物细胞工程的实际应用：