①按照PCR反应体系配方配制反应液;
②将PCR反应体系50μL用微量移液器转移到微量离心管(0.5mL)中;
③将微量离心管放到PCR仪中;
④设置PCR仪的工作参数。
⑤DNA在PCR仪中大量扩增。
2.4 水浴法:将微型离心管依次在 ℃、 ℃、 ℃的恒温水浴锅中循环处理相应时间。
3.实验注意事项
(1)避免外源DNA污染:所用仪器、缓冲液、蒸馏水等使用前高压灭菌。
(2)缓冲液和酶分装成小份,-20℃低温保存。
(3)每添加一种反应成分,更换一个移液器的枪头。
(4)混匀后离心处理,使反应液集中在离心管底部。
(三)课堂总结、点评
(五)巩固练习
1.DNA分子复制时,解旋的两条链中( )
A仅一条作为复制模板
B两条链作为模板并复制出两个不同的DNA分子