1.DNA分子的切割技术
(1)工具:限制性内切酶(限制酶)。
(2)来源:主要存在于微生物中。
(3)限制性内切酶的功能特点
①会识别DNA上某种核苷酸的特定序列和位置。
②在特定序列中的特定位点将DNA切开。
(4)实例:限制性内切酶EcoRⅠ
①只能识别GAATTC序列的位点,并且在G和A之间将这段DNA序列切开。
②切开的DNA两条单链的切口之间正好互补配对,这样的切口叫做黏性末端。
2.DNA分子的连接技术
(1)工具:DNA连接酶。
(2)作用
①用同一种限制酶分别把两种不同来源的DNA切成片段,混合后它们就会通过黏性末端互相识别,自动靠拢,进行碱基配对。
②黏性末端与末端之间留有的空隙则靠DNA连接酶进行"缝合",如图。
小贴士 限制性内切酶的作用是切割识别特定的核苷酸序列的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。DNA连接酶的作用是催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键,从而将相邻的脱氧核糖核苷酸连接起来,而不是连接互补碱基之间的氢键。
下图为DNA分子的切割和连接过程,请据图分析: