2019-2020学年 人教版 选修1多聚酶链式反应扩增DNA片段 教案学习目标 1.分析PCR技术与DNA复制的区别和联系,掌握PCR技术原理。2.分析PCR的过程,掌握PCR循环的原理。3.掌握PCR技术的实验操作过程及注意事项。4.掌握DNA含量测定的方法。
一、PCR技术的原理与反应过程
1.细胞内DNA复制的条件
原料 4种脱氧核苷酸 模板 2条DNA母链 酶 解旋酶和DNA聚合酶 引物 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸
特别提醒 (1)DNA复制需要引物。(2)引物是一小段DNA或RNA,它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。(3)用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸。(4)生成子链DNA:以DNA的一条链为模板,在DNA聚合酶的作用下,从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸,合成DNA。
2.PCR扩增的原理及条件
(1)PCR技术:即多聚酶链式反应,是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。它能以极少量的DNA为模板,在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。
(2)引物:DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3′端延伸DNA链,因此,DNA复制需要引物。
(3)合成方向:总是从子链的5′端向3′端延伸。
(4)原理:DNA的热变性原理,即: