2．稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将 进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。

　　　系列稀释操作：

　　①取盛有 mL水的无菌试管6支 ，编号101、102、103、104、105、106。

　　②用灼烧冷却的移液管吸取 mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次使之混匀。

　　③从101倍液中吸取 mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。依此类推。

〖思考12〗系列稀释操作的注意事项是什么？

〖思考13〗涂布平板操作的步骤是什么？

结果分析与评价

　　1　培养未接种培养基的作用是什么？，若有菌落形成，说明什么？

　　2　在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？

　　3　培养12h和24h后的菌落大小？；菌落分布位置？原因？

　　〖思考14〗在某培养基上出现了3种特征不同的菌落是什么原因？

　　〖思考15〗频繁使用的菌种利用什么法保存？长期保存菌种的方法是什么？

典例精析

【例1】下列关于微生物营养的说法，正确的是..........................................( )

A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B．凡是碳源都能提供能量

c．除水以外的无机物仅提供无机盐 D．无机氮源也能提供能量

【例2】细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌.........( )

A．接种针、手、培养基 B．高压锅、手、接种针

C．培养基、手、接种针 D．接种针、手、高压锅

【例3】以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是...........................( )

A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯

C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板

　　D．待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置

【例4】下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是

A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌