(1)限制酶和DNA连接酶的作用部位相同吗？相同。

　　(2)DNA连接酶起作用时是否需要模板？不需要。

　　考问4　探究载体所具条件的意义

条　件 意　义 稳定并能自我复制 目的基因稳定存在且数量可扩大 有一个至多个限制酶切割位点 可携带多个或多种外源基因 具有特殊的标记基因 便于重组DNA的鉴定和选择 　　【题组跟进】

　　高考题组--研考向

　　　基因工程操作工具的基础考查

　　1．[2018·北京卷，5]用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是(　　)

　　A．图1中两种酶识别的核苷酸序列不同

　　B．图2中酶切产物可用于构建重组DNA

　　C．泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物

　　D．图中被酶切的DNA片段是单链DNA

　　解析：限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，不同的限制酶能识别不同的核苷酸序列，由电泳图可知XhoⅠ和SalⅠ两种酶分别切割时，识别的序列不同，A正确；同种限制酶切割出的DNA片段，具有相同的粘性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，B正确；SalⅠ将DNA片段切成4段，XhoⅠ将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道①为SalⅠ，泳道②为XhoⅠ，C正确；限制酶切割双链DNA，酶切后的DNA片段仍然是双链DNA为主，只在黏性末端出现部分单链，D错误。

　　答案：D

　　　　基因工程操作工具的综合考查

　　2．[2018·全国卷Ⅰ节选]回答下列问题：

　　(1)博耶(H. Boyer)和科恩(S. Cohen)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了________________________________________________________________(答出两点即可)。

　　解析：(1)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达，该过程证明了体外重组的质粒可以进入受体细胞，真核生物基因可在原核细胞中表达等。

答案：(1)体外重组的质粒可以进入受体细胞；真核生物基因可在原核细胞中表达