各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。
基因组文库:含有一种生物的 基因
② 种类
cDNA文库:含有一种生物的 基因
③ 目的基因的获取
根据基因的有关信息:基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因。
(2)利用PCR技术扩增目的基因。
① PCR:是一项在生物体外 特定DNA片段的核酸合成技术。
② 条件:已知目的基因的 序列。
③ 过程:目的基因DNA受热形成 ,与 结合,然后在 ______的作用下进行延伸形成DNA。
④ 方式:指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)
(3)人工合成法:基因较小,核苷酸序列已知,可以人工合成。
二、基因表达载体的构建
1、表达载体的组成:目的基因+ + +标记基因等。
2、启动子:位于基因的 ,它是 结合
的部位,驱动基因转录产生mRNA。
3、终止子:位于基因的 ,终止 。
4、表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且 给下一代;使目的基因 ____ 和发挥作用。
5、标记基因: 受体细胞是否含有目的基因。
6、不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同,基因表达载体的构建上也会有所差别。
三、将目的基因导入受体细胞
(一)转化:目的基因进人受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和 的过程。
(二)方法
1、将目的基因导入植物细胞
(1)农杆菌转化法
① 农杆菌特点:易感染 植物和裸子植物,对___________植物没有感染力;Ti质粒的 可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上。
② 转化:目的基因插人 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。
(2)基因枪法
基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高。
(3)花粉管通道法
花粉管通道法:这是我国科学家独创的一种方法,是一种十分简便经济的方法。(我国的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的)
2.将目的基因导入动物细胞
(1)方法: 注射技术。
(2)操作程序:目的基因表达载体 →取卵(受精卵) →显微注射→注射了