1．下列获得目的基因的方法中需要模板链的是(　　)

①化学合成法　②鸟枪法　③反转录法　④PCR扩增目的基因

A．①② B．②③ C．③④ D．①③

答案　C

解析　化学合成法是利用DNA自动合成仪合成已知核苷酸序列的较小的基因。鸟枪法是用很多个限制性内切酶去切割DNA获得目的基因，和化学合成法一样不需要模板。反转录法利用mRNA作为模板反转录出一条单链DNA，然后以这条单链的DNA为模板合成出双链的DNA，也是目的基因。PCR技术也需要模板。

2．下列属于PCR技术的条件的是(　　)

①单链的脱氧核糖核苷酸序列引物　②目的基因所在的DNA片段　③脱氧核糖核苷酸　④核糖核苷酸　⑤DNA连接酶　⑥DNA聚合酶　⑦限制性内切酶

A．①②③⑤ B．①②③⑥

C．①②③⑤⑦ D．①②④⑤⑦

答案　B

解析　PCR技术需要一对引物，即一对单链的脱氧核糖核苷酸序列引物，①正确；PCR技术需要模板，即目的基因所在的DNA片段，②正确；需要脱氧核糖核苷酸作为原料，③正确；核糖核苷酸是合成RNA的原料，而PCR合成的是DNA，④错误；采用PCR合成DNA时，不需要DNA连接酶，而需要DNA聚合酶，⑤错误、⑥正确；体外合成DNA时，不需要限制性内切酶，⑦错误。

知识拓展　PCR技术的基本原理和过程

(1)原理：DNA双链复制。

(2)前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列。

(3)过程

第一步：加热至94～98 ℃，DNA解链为单链；

第二步：冷却至40～60 ℃，引物结合到互补DNA链；

第三步：加热至72 ℃左右，热稳定DNA聚合酶(TaqDNA酶)从引物起始进行互补链的合成。

如此重复循环多次。

(4)结果：每一次循环后，目的基因的量可以增加一倍，即成指数形式扩增(约为2n，n为扩增循环的次数)。