使其在体外受精。
2原理:人工模拟体内环境(包括营养、温度、pH等),使初级卵母细胞成熟和精子获能,最终完成受精和胚胎保存。
3步骤:主要包括卵细胞的采集、精子的获取和受精等几个主要步骤
①卵母细胞的采集和培养
(1)、小型动物如小鼠、兔、猪、羊等
用促性腺激素处理,使其排出更多的卵子,然后从输卵管中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。(超数排卵法)
(2)、大型动物如牛等
从屠宰场的卵巢中采集卵母细胞
借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞(活体取卵)
采集的卵子是否马上可以受精?
在体外培养成熟后(MⅡ中期),才能与获能的精子受精
②精子的采集和获能
(1) 收集的方法:
假阴道法、手握法和电刺激等
(2)精子体外获能的方法:
培养法:把精子放入获能液中。(啮齿动物、家兔和猪)
化学法:把精子放入一定浓度肝素或钙离子载体A23187溶液中。 (牛、羊等家畜)
[思考与讨论] 1.从卵巢中采集的卵子为什么不能与获能精子直接受精?
提示:卵巢中卵子不成熟,需要培养到减数第二次分裂中期时才具有受精能力。
2.精子获能处理前为什么要离心处理?
提示:因为精液由精子和精清两部分组成,精清中含有抑制精子获能的物质,所以要离心除去精清以利于精子获能。
③受精:
获能的精子和卵子在获能溶液或专用受精溶液中受精,其过程概括如下: