化、灭菌、倒平板。

3．倒平板操作

1．培养基灭菌后，需要冷却至50 ℃左右时，才能倒平板的原因是什么？你用什么办法来估计培养基的温度？

提示　琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，倒平板时高于50 ℃则会烫手，低于50 ℃时若不及时操作，琼脂会凝固。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。

2．分析下图，回答下列问题：

(1)为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

提示　通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

(2)从防止杂菌污染的角度思考，平板冷凝后将平板倒置的原因是什么？

提示　平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。

3．怎样判断制备的培养基是否合格、成功，是否受到污染？

提示　未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后，如果无菌落生长，说明培养基制备成功、合格，未受到污染。

1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，下列关于倒平板的具体描述正确的是(　　)

①待培养基冷却至40 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板　②将灭过菌的培养皿放在桌