ⅰ原理
ⅱ计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M。
C:代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V:代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M:代表稀释倍数。
ⅲ注意事项
a.为了保证结果准确,一般设置三个平板,选择菌落数在30~300的平板进行计数,并取平均值。
b.统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。原因是当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。因此,统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。
c.设置对照:主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
②其他方法:利用显微镜直接计数。
2.实验设计及操作提示
(1)实验设计
①土壤取样
从富含有机质、酸碱度接近中性且潮湿的土壤取样。先铲去表层土,在距地表约3~8 cm的土壤层取样。
②样品的稀释
ⅰ稀释原因:样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目。
ⅱ稀释标准:选用一定稀释范围的样品液进行培养,保证获得菌落数在30~300之间,便于计数。
ⅲ微生物的培养与观察
a.培养:不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。
b.观察:每隔24_h统计一次菌落数目,最后选取菌落数目稳定时的记录