过程 循环次数 受生物体自身控制 30多次 产物 完整DNA 两个引物之间的DNA片段 相同点 都需要DNA模板、4种脱氧核苷酸、分别与两条模板链相结合的两种引物，都是半保留复制，严格遵循碱基互补配对原则 　　【易错易混】　关于PCR技术的三个易误点

　　(1)DNA母链的3′端对应着子链的5′端，即DNA的两条链是反向平行的。

　　(2)解旋酶的作用是使DNA两条链的氢键断开，DNA聚合酶、DNA连接酶催化形成磷酸二酯键。

　　(3)DNA聚合酶是将单个核苷酸加到已有的单链片段的3′端上，需要模板；而DNA连接酶连接的是两条DNA片段的缺口，不需要模板。

　　2．PCR扩增的理论计算

　　(1)若只有一条DNA模板，则复制n次后有2n条DNA；

　　(2)若一开始有a条模板，则复制n次后有a×2n条DNA。

　　实际操作过程中，由于无关变量的影响，一般来说实际值要略小于理论值，若扩增效率为x，y代表DNA片段总数，n代表循环次数，那么y＝(1＋x)n。

　　[对点演练]

　　1．下列关于PCR技术的叙述，正确的是(　　)

　　A．PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上

　　B．该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶

　　C．该技术需要一对特异性的引物，且要求这一对引物的序列是互补的

　　D．该技术应用体内DNA复制的原理，也需要模板、原料、酶等条件

　　解析：选D　利用PCR技术进行DNA扩增时，目的基因的序列可以不是完全已知的；由于PCR反应需要在高温条件下进行，因此需要耐热的DNA聚合酶，PCR过程中DNA的解旋是通过控制温度实现的，不需要解旋酶；PCR反应中的引物可分别与两条模板链相结合，这对引物的序列不能互补；PCR技术应用了细胞内DNA复制的原理，也需要DNA模板、原料(4种脱氧核苷酸)、酶(如Taq DNA聚合酶)等条件。

2．PCR是一种体外快速扩增DNA的方法，用于放大特定的DNA片段，数小时内可使目的基因片段扩增到数百万个。PCR需要模板DNA、引物、脱氧核苷酸和DNA聚合酶等条件。下图为模板DNA分子及2种引物，请据图回答相关问题：