初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导人棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)，导入棉花受精卵，结果成长的植株，有了抗虫能力。由以上过程推知，作为目的基因的运载体应具备的结构是( )

A．目的基因、启动子 B．目的基因、终止子

C．目的基因、启动子、终止子 D．目的基因、启动子、终止子、标记基因

三、将目的基因导入受体细胞

　　(一)转化：目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和 的过程。

　　(二)方法

　　1．将目的基因导入植物细胞

　　(1)农杆菌转化法

　　①农杆菌特点：易感染 植物和裸子植物，对___________植物没有感染力；Ti质粒的 可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。

　　②转化：目的基因插人 农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。

　　(2)基因枪法

　　 基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。

　　(3)花粉管通道法

　　 花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（我的的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的）

　　2．将目的基因导入动物细胞

　　(1)方法： 注射技术。

　　(2)操作程序：目的基因表达载体 →取卵(受精卵) →显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到____性动物的_______________________________内发育→新性状动物。

　　3．将目的基因导人微生物细胞

　　(1)原核生物特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。

　　(2)大肠杆菌最常用的转化方法是： 处理细胞→ 细胞→表达载体与感受态细胞混合→ _________ 细胞吸收DNA分子。

　　典例3采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是 ( )

　　①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导人细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵

A、①② B、②③ C、③④ D、①④

四、目的基因的检测与鉴定

　　1．检测

(1)方法：DNA分子杂交技术、抗原抗体分子杂交方法。

(2)内容

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入 。

②检测目的基因是否转录 。

③检测目的基因是否翻译成 。

　　2．鉴定： 鉴定、抗病鉴定等。

反馈矫正：

一、选择题：

A 1、下列属于获取目的基因的方法的是 ( )

①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取

③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术

⑤利用DNA转录 ⑥人工合成

A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④ D．①②④⑥