切酶切割时，才能让目的基因插入到A处且使原有基因失活。

2．用限制性内切酶EcoRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14 kb(1 kb即1 000个碱基对)的长链，而同时用限制性内切酶EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，见下图(其中*表示EcoRⅤ限制性内切酶切割后的一个黏性末端)。

若用MboⅠ限制性内切酶单独切割该普通质粒，则产生的DNA片段的长度为(　　)

A．2.5和5.5 B．2.5和6

C．5.5和8 D．6和8

答案　D

解析　依图示可知，该质粒上有1个EcoRⅤ限制性内切酶的切点、2个MboⅠ限制性内切酶的切点，故用限制性内切酶MboⅠ单独切割该质粒时，将产生长度为6和8的两种片段。

3．(2016·全国Ⅲ，40改编)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(运载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。

根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

(1)经BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被________酶切后的产物连接，理由是______________________________________。

(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有________，不能表达的原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。