(1)PCR的全称是____________。PCR与体内DNA复制的不同之处主要表现在温度环境的不同,在PCR技术中先用95 ℃高温处理的目的是____________,而这一过程在细胞内是通过__________________实现的。
(2)在PCR技术中所需要的引物实质上是一种____________________。请在图中绘出引物结合的位置。
(3)若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入________个引物。
(4)DNA子链复制的方向是____________,这是由于______________________________________________。
解析:PCR技术又称多聚酶链式反应。在PCR技术中,用95 ℃高温处理的目的是使DNA分子中的氢键断裂,两条链解开,即使DNA变性。引物是一种单链DNA或RNA分子,它能与解开的DNA母链的3′端结合,为DNA聚合酶提供吸附位点,使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸,从而决定了DNA子链复制的方向是从5′端到3′端。在DNA分子扩增时,需要2种引物,由于新合成的子链都需要引物作为复制的起点,故所需的引物数目等于新合成的DNA子链数目,即2×210-2=211-2(个)。
答案:(1)多聚酶链式反应 使DNA变性(使DNA的两条链解开) 解旋酶的催化 (2)单链DNA或RNA分子 如图所示
(3)211-2 (4)从5′端到3′端 DNA聚合酶只能从引物的3′端开始连接单个脱氧核苷酸分子
探究点二 PCR的实验操作及DNA含量的测定
[共研探究]
PCR反应是在PCR仪中完成的,经过多次循环使DNA片段得以大量地扩增,这个过程有严格的操作规程。理论上DNA呈指数增长,但实际可能会有诸多因素影响DNA含量,所以需要对DNA含量进行测定。
1.结合下面实验操作过程,回答下列问题:
(1)实验操作过程