课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

　　1．分析培养基对微生物的分离作用。2.进行土壤中微生物的分离、计数和鉴定。(重、难点)

　　知识点一　筛选菌株的思路及计数

　　1．筛选菌株

　　(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。

　　(2)选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。

　　2．统计菌落数目

　　(1)活菌计数法：常用稀释涂布平板法。

　　①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

　　②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M。

　　C：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。

　　V：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。

　　M：代表稀释倍数。

　　③统计方法：为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在 30～300的平板进行计数，并取其平均值。

　　(2)显微镜直接计数法：在显微镜下直接观察和计数微生物的数量。

　　3．设置对照

　　(1)对照实验：除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。

　　(2)主要目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。

　　1．三种筛选方法的特点及举例

方法 特点 举例 利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养 通过控制培养基的营养成分，使营养缺陷型微生物不能正常生长 缺乏氮源时可以分离固氮微生物