基因工程的操作工具
重组DNA技术是在DNA分子水平上设计和施工的,需要分子的"剪刀"和"针线"等工具。观察下图并回答下列问题,理解基因工程基本工具。
(1)图甲中大肠杆菌的一种叫做EcoRⅠ的限制性核酸内切酶,能够专一识别-GAATTC-的核苷酸序列,并在G和A之间将这段序列切开。
(2)从图甲到图乙变化过程得出:限制性核酸内切酶切割DNA分子后形成的黏性末端是可以通过碱基互补配对连接起来的,但是脱氧核糖和磷酸之间的缺口要靠DNA连接酶进行连接。
(3)目的基因导入过程需要运载体,常用质粒(如图)、噬菌体或动植物病毒等。
质粒是拟核或细胞核外环状的DNA分子,是基因工程最常用的运载体。上面通常含有的抗性基因可以作为标志基因用于目的基因是否导入受体细胞的检测依据。
基因工程的基本工具
(1)基因的"剪刀"--限制性核酸内切酶(简称限制酶)
①存在:主要存在于微生物中,种类有200多种。
②作用与特性:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点切割DNA分子,也就是说限制酶具有专一性和特异性。
③作用结果:一般产生黏性末端(碱基能互补配对)。