第9课时 生物成分的分离与测定技术
[学习导航] 1.掌握电泳法分离大分子的原理。2.运用常用的方法提取和分离蛋白质。3.尝试从血清中提取和分离血红蛋白。4.了解芳香油的特点,知道提取芳香油的原理及会设计简单的实验装置进行提取。
[重难点击] 1.电泳法分离大分子的原理。2.运用常用的方法提取和分离蛋白质。
一、蛋白质的分离与纯化
1.分离与测定生物成分中蛋白质的技术包括离心沉降法、薄膜透析法、凝胶色谱法和电泳法等。采用醋酸纤维薄膜电泳的方法可以将所带电荷的数量和性质不同的蛋白质从混合样品中分离并纯化出来;采用水蒸气蒸馏法和脂溶性有机溶剂提取法可以分离生物组织中的脂肪。
2.蛋白质分离的抽提方法
3.蛋白质的分离方法
(1)离心沉降法:通过控制离心速度,使分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层。
(2)薄膜透析法:利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性,使蛋白质与其他小分子化合物分离的方法。
(3)凝胶色谱法
①概念:根据蛋白质分子量的大小差异对其进行有效分离的方法。
②原理
a.凝胶